高床保育舍空氣微生物檢測簡易方法
發(fā)布日期：2016-10-11點(diǎn)擊次數(shù)：1627
高床保育舍/仔豬舍由于空間電場凈化微生物氣溶膠的特殊性（空氣微生物荷電后做趨向培養(yǎng)皿的定向移動）故不能采用常規(guī)的落菌檢測方法，故在此處推薦采用以下簡易定量測定法。如有條件，則可以采用空氣微生物采樣器進(jìn)行采樣測定。
實(shí)驗(yàn)分析：本實(shí)驗(yàn)采用簡易定量測定法，用無菌注射器定量抽取空氣，將所取空氣壓入培養(yǎng)基內(nèi)部，經(jīng)培養(yǎng)后，即可定量、定性測定空氣中細(xì)菌、真菌等微生物，此法簡單易行。
采樣點(diǎn)：設(shè)豬床下方15cm為采樣區(qū)域，各點(diǎn)每天分別選在8：00、11：00、15：00、20：00、22：00進(jìn)行，連續(xù)2-3天，按照“田”字形進(jìn)行樣品的采集，菌落數(shù)取平均值。
實(shí)驗(yàn)一、細(xì)菌總量的測定
1、實(shí)驗(yàn)儀器：無菌注射器、無菌培養(yǎng)皿、溫濕度培養(yǎng)箱。
2、實(shí)驗(yàn)試劑：營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。
3、實(shí)驗(yàn)步驟：
（1）按比例配制培養(yǎng)細(xì)菌用的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，滅菌后融化，在50℃水浴中保溫備用。
（2）利用50~100mL無菌注射器抽取待測環(huán)境空氣20~100ml。
（3）在無菌操作下，取已融化培養(yǎng)基倒入無菌平皿中，平皿稍作傾斜，將注射器插入培養(yǎng)基深處，緩慢將空氣壓入培養(yǎng)基內(nèi)，輕輕搖勻以消除氣泡。待培養(yǎng)基凝固，置于30℃恒溫箱中培養(yǎng)3d后統(tǒng)計細(xì)菌菌落數(shù)量，推算1L空氣所含細(xì)菌量。。
4、環(huán)境因素測定：采樣同時記錄豬舍內(nèi)外相對溫度和濕度。
5、實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
計數(shù)菌落形成單位數(shù)（CFU），空氣中微生物濃度按奧梅梁斯基氏法計算。
微生物密度測定記錄：將計算結(jié)果填入表。
6、按平均值繪制日變化曲線。
7、對照舍重復(fù)以上步驟。
實(shí)驗(yàn)二、真菌總量的測定
1、實(shí)驗(yàn)儀器：無菌注射器、無菌培養(yǎng)皿、溫濕度培養(yǎng)箱。
2、實(shí)驗(yàn)試劑：PDA培養(yǎng)基。
3、實(shí)驗(yàn)步驟：
（1）配制培養(yǎng)真菌用的PDA培養(yǎng)基，滅菌后融化，在50℃水浴中保溫備用。
（2）利用50~100mL無菌注射器抽取待測環(huán)境空氣20~100ml。
（3）在無菌操作下，取已融化培養(yǎng)基倒入無菌平皿中，平皿稍作傾斜，將注射器插入培養(yǎng)基深處，緩慢將空氣壓入培養(yǎng)基內(nèi)，輕輕搖勻以消除氣泡。待培養(yǎng)基凝固，置于30℃恒溫箱中培養(yǎng)5d后統(tǒng)計真菌菌落數(shù)量，推算1L空氣所含真菌量。統(tǒng)計霉菌數(shù)量時培養(yǎng)的時間稍許延長。應(yīng)用此法需多做平行試驗(yàn)，求其平均值以提高性。
4、環(huán)境因素測定：采樣同時記錄豬舍內(nèi)外相對溫度和濕度。
5、實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
計數(shù)菌落形成單位數(shù)（CFU），空氣中微生物濃度按奧梅梁斯基氏法計算。
微生物密度測定記錄：將計算結(jié)果填入表
6、按平均值繪制日變化曲線。
7、對照舍重復(fù)以上步驟。